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在探索中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)時(shí),凝集素作為一種神經(jīng)示蹤劑而被廣泛使用。軸突運(yùn)輸?shù)姆较蛐钥梢酝ㄟ^(guò)選擇合適的示蹤分子來(lái)控制; 從胞體到突觸(順行)或從突觸到胞體(逆行運(yùn)輸)。
逆行示蹤:
1971年,有研究人員發(fā)現(xiàn)HRP酶是一種有效的神經(jīng)元逆行示蹤劑(Ref.82)。它可以通過(guò)被動(dòng)內(nèi)吞作用非選擇性地穿過(guò)神經(jīng)元膜(Ref.83)。隨后科學(xué)家們又發(fā)現(xiàn)HRP的偶聯(lián)可以增加細(xì)胞攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)的速率(Ref.84)。
順行+逆行追蹤:
當(dāng)WGA與神經(jīng)元質(zhì)膜上的糖鏈結(jié)合時(shí),它會(huì)通過(guò)被動(dòng)內(nèi)吞作用被內(nèi)化,并在順行和逆行方向上進(jìn)行運(yùn)輸,從而廣泛覆蓋整個(gè)神經(jīng)元(Ref.85)。WGA還可以通過(guò)突觸傳遞到神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中的其他神經(jīng)元(Ref.86)。
順行示蹤:
PHA-L是最早和最-常-用的順行示蹤劑之一(Ref.84)。和WGA一樣,PHA-L在細(xì)胞內(nèi)化之前也是先與質(zhì)膜上的糖鏈結(jié)合。有關(guān)神經(jīng)示蹤技術(shù)的更全面的綜述,請(qǐng)參見(jiàn)Vercelli等人的文章(Ref.88)。
精選文獻(xiàn)
• Visualization of anterograde neuronal transport (Refs. 1 and 2)
• Determination of neuron-cell interaction (Ref. 16)
• Tracking transneuronal transport of viral particles (Ref. 55)
• Observing neuron-neuron interactions (Refs. 34 and 111)
• Demonstrate specific protein expression of neurons (Ref. 35)
實(shí)驗(yàn)流程概覽 (參考Ref. 4).
對(duì)于PHA-L的使用,建議您參考:追蹤傳出神經(jīng)元投射的PHA-L示蹤法
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